Mô tả chi tiết
Mục đích sử dụng:
Phương pháp bảo vệ chọn lọc enzyme đồng nhất để xác định định lượng Cholesterol LDL trong huyết thanh và huyết tương.
Nguyên tắc kiểm tra:
LDL trong Mẫu được bảo vệ khỏi phản ứng bằng cách bổ sung Thuốc thử màu Enzyme, Chất hoạt động bề mặt đa năng và lưỡng tính. Cholesterol Esterase và Cholesterol Oxidase phản ứng với các lipoprotein không phải LDL, VLDL, HDL và Hydrogen Peroxide được giải phóng trong quá trình phản ứng bị phân hủy bởi catalase trong R1:
Cholesterol Esterase
CM / VLDL / HDL Cholesterol + H202+02 ------------------------------------> Cholistenone + Fatty acids+H202
CATALASE
2H2O2 --------------------> O2 + 2H2O
Ở bước thứ hai của phản ứng, dung dịch phản ứng sẽ loại bỏ thuốc thử bảo vệ khỏi LDL và catalase bị bất hoạt bởi Natri Azide. Ở bước này Cholesterol Esterase và Cholesterol Oxidase chỉ phản ứng với LDLC. Hydrogen Peroxide được tạo ra bởi phản ứng enzyme với LDL C tạo ra phức hợp màu khi ngưng tụ oxy hóa với HDOAS và 4-Amino antipyrine với sự có mặt của Peroxidase. Bằng cách đo độ hấp thụ của phức hợp màu xanh lam được tạo ra ở bước sóng khoảng 600 nm, nồng độ LDL-C trong mẫu sẽ được tính toán.
Chol Esterase / Oxidase
LDL-Cholesterol + H2O2 -------------------------------------------> Cholestenone + fatty acids + H2O2
POD
H2O2 + 4Amino Antipyrine + HDOAS -----------------> Blue colour complex + 3H2O
Bản tóm tắt:
Lipoprotein mật độ thấp (LDL) đóng vai trò chính trong việc gây ra và ảnh hưởng đến sự tiến triển của chứng xơ vữa động mạch và xơ cứng mạch vành nói riêng. LDL có nguồn gốc từ VLDL (Lipoprotein mật độ rất thấp) giàu chất béo trung tính nhờ hoạt động của các enzyme phân giải mỡ khác nhau và được tổng hợp ở gan. Việc loại bỏ LDL khỏi huyết tương diễn ra chủ yếu bởi các tế bào nhu mô gan thông qua các thụ thể LDL cụ thể. Nồng độ LDL trong máu tăng cao và thời gian lưu trú của chúng tăng lên cùng với sự gia tăng tốc độ biến đổi sinh học dẫn đến sự phá hủy chức năng nội mô và sự hấp thu LDL-cholesterol cao hơn trong hệ thống bạch cầu đơn nhân/đại thực bào cũng như các tế bào cơ trơn ở vách tàu. Phần lớn cholesterol được lưu trữ trong các mảng xơ vữa động mạch có nguồn gốc từ LDL. Giá trị LDL-cholesterol là yếu tố dự đoán lâm sàng mạnh mẽ nhất trong số tất cả các thông số đơn lẻ liên quan đến chứng xơ vữa động mạch vành. Do đó, các liệu pháp tập trung vào việc giảm lipid chủ yếu nhắm vào việc giảm LDL-cholesterol, sau đó được thể hiện ở việc cải thiện chức năng nội mô, ngăn ngừa xơ vữa động mạch và giảm sự tiến triển của nó cũng như ngăn ngừa vỡ mảng bám.
Đặc tính kĩ thuật:
R1 Enzyme Colour Reagent:
- Good’s Buffer pH 6.8 25 mmol/l
- Cholesterol Oxidase 5000 U/l
- Cholesterol Esterase 5000 U/l
- Catalase 1000000 U/l
- Ascorbate Oxidase 5 U/ml
- Peroxidase 4 KU/l
R2 Reacting Solution
- Aminoantipyrine 4 mmol/l
- POD 20000 U/l
- Độ tuyến tính: Lên tới 10 mmol/l
Đóng gói: R1: 3 x 20ml R2: 2 x 10ml